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          當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章2分鐘!帶您快速了解液相色譜柱

          2分鐘!帶您快速了解液相色譜柱

          更新時間:2023-02-24點擊次數(shù):836
            色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。用于HPLC的各種微粒填料好多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10um等,柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難的分離物質(zhì)對則可采用高達2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
           
            液相色譜柱的柱效受柱內(nèi)外因素影響,為使色譜柱達到較佳效率,除柱外死體積要小外,也要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使較好的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍料徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對柱效的影響遠遠大于管壁效應(yīng)。
           
            液相色譜柱的規(guī)則:
           
            色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類
           
            ①常規(guī)分析柱(常量柱),內(nèi)徑2~5mm,柱長10~30cm;
           
            ②窄徑柱(narrowbore),內(nèi)徑1~2mm,柱長10~20cm;
           
            ③毛細(xì)管柱(又稱微柱microcolumn),內(nèi)徑0.2~0.5mm;
           
            ④半制備柱,內(nèi)徑>5mm;
           
            ⑤實驗室制備柱,內(nèi)徑20~40mm,柱長10~30cm;
           
            ⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達幾十厘米。

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